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- 生化试剂
货号 | 规格 | 销售价 |
---|---|---|
MF214-01 | 500U | 98.00 |
MF214-05 | 5x500U | 398.00 |
MF214-10 | 10x500U | 798.00 |
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产品名称 单位 货号
M5 Taq DNA Polymerase with Mg2+-free Buffer 500U MF214-01
M5 Taq DNA Polymerase with Mg2+-free Buffer 5x 500U MF214-05
M5 Taq DNA Polymerase with Mg2+-free Buffer 10x 500U MF214-10
【储存条件】
长期保存,请置于-20˚C。
【产品简介】
本产品是从高度耐热菌Thermus aquaticus 中克隆其DNA聚合酶基因,原核表达后经柱层析纯化获得的超纯、高效、耐热DNA聚合酶,SDS-PAGE 显示为一条94kD的蛋白条带。该酶除具有5’-3’DNA 聚合活性外,还具有少量的5’-3’DNA 外切活性,但不具有3’-5’DNA外切活性(校读活性),适用于常规PCR扩增。M5 Taq DNA Polymerase 扩增得到的 PCR 产物含有 3’-A 碱基,可直接用于 TA 克隆 (聚合美TOPO-TA克隆载体货号:MF019或MF020)。
【产品组份】
M5 Taq DNA Polymerase (5 U/µl) 100 μl
10x M5 Taq PCR Buffer (Mg2+-free) 1.0 ml
25 mM MgCl2 200 μl
10x M5 Taq PCR Buffer (Mg2+-free) 成分:100 mM TrisCl (pH 8.3), 500 mM KCl
【活性定义】
用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物,在74℃、30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定义为 1 个活性单位(U)。
【适用范围】
- 基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。
- 用于从复杂模板中如基因组等扩增PCR产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。
【所需试剂】使用者需准备PCR反应的模板、引物、dNTPs和蒸馏水等。
【操作示例】
按下表配制PCR反应体系(冰上操作):
Template DNA*
1 μl
10× M5 Taq PCR Buffer
5 μl
25 mM MgCl2
3 μl**
10mM dNTPs
1 µl
正向引物 (10 μM)
1 µl
反向引物 (10 μM)
1 µl
M5 Taq DNA Polymerase(5U/µl)
0.5-1 µl
ddH2O补足至
50 µl
建议的PCR条件:
94°C
2 min.
25-35 cycles of:
94°C
30 sec.
55–65°C
30 sec.
72°C
30sec.-1min./1kb DNA
72°C
5 min.
保持 4°C forever
<*模板量:10~1000 ng 基因组 DNA,1~30 ng 质粒,或 1~2 μl RT-PCR 反应后的 cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系
** 镁离子的最佳浓度为 1.5~2.0 mM,优化时可以 0.5 mM 梯度递增,最高到 4 mM。>。
【电泳结果检测】取2 μl反应液,添加上样缓冲液,电泳观察结果。
【备注】
本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。