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M5 HiPer PfuDash DNA Polymerase ( with dNTPs)(Fastpfu酶替代品)
货号 规格 销售价
MF272-01 -100U (100ul) 398.00
MF272-05 5x100U (500ul) 1798.00
  • M5 PfuDash DNA Polymerase

     ( with dNTPs)使用说明书

     

    产品名称                   单位          货号

    M5 PfuDash DNA Polymerase    100U       MF272-01

    M5 PfuDash DNA Polymerase    5×100U     MF272-05

     

    储存条件

    长期保存,请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,可置于4˚C保存至少六个月。

     

    产品简介

    聚合美PfuDash DNA聚合酶具有5’ 到3’ DNA 聚合酶活性和3’ 到5’ 的外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象,在标准缓冲液中其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase的30倍、普通Pfu DNA Polymerase的2倍。同时该酶还具有快速的DNA合成速度,约相当于普通Taq DNA Polymerase的4-6倍、普通Pfu DNA Polymerase的8-10倍。该酶合成能力很强,即使是复杂的模板,也能快速准确的完成反应,尤其适用于对保真性要求高的DNA长片段的快速扩增,如基因克隆、测序、定点突变、SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。使用聚合美PfuDash DNA聚合酶扩增得到的PCR产物无3'端突出碱基,不可直接用于TA克隆,可以直接连入聚合美特制的平末端TOPO克隆载体(货号MF021和MF022)。

     

    单位定义

    用大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74˚C、30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量。

     

    产品组份

    PfuDash DNA Polymerase (1U/μl)          100 μl

    10×PfuDash PCR Buffer                  1.0 ml

    25mM MgSO4                      1.0 ml

    2mM dNTPs                       1.0 ml

     

    【质量控制】

    以λ DNA为模板,能有效扩增20 kb的DNA片段;以基因组DNA为模板,能有效扩增单拷贝基因;无内切酶和外切酶污染。

     

    适用范围

    高保真扩增,长片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变等;高GC含量、具有二级结构的复杂模板的扩增。

     

     

    操作示例

    按下表配制PCR反应体系:

    10×PfuDash PCR Buffer                        

    2.5 μl

    25mM MgSO4

    2.5 µl

    2mM dNTPs

    2.5 µl

     Primer 1 (10 μM)                      

    0.5 µl

     Primer 2 (10 μM)                     

    0.5 µl

    Template DNA* 

    10-200ng

    PfuDash DNA Polymerase

    0.5µl

     ddH2O补足至

    25 µl

     

    建议的PCR条件

     

    95°C

    2 min.

    32-36 cycles of:

     

    95°C

    25 sec. 

    53–64°C

    20-35sec. 

    72°C

    15-30sec./1kb  

    72°C

    5 min. 

    4°C

    forever

     

    <*模板量:10~200 ng 基因组 DNA,10~30 ng 质粒,或 1~2 μl RT-PCR 反应后的 cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系>。

     

     

     

     

    备注

    本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。