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货号 | 规格 | 销售价 |
---|---|---|
MF169-01 | 100U | 698.00 |
MF169-05 | 5x100U (500ul) | 2880.00 |
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X5 Hot Start High-Fidelity DNA
Polymerase ( with dNTPs)使用说明书
产品名称 单位 货号
X5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase 100U MF169-01
X5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase 5×100U MF169-05
【储存条件】
长期保存,请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,可置于4˚C保存至少六个月。
【产品简介】
聚合美X5热启动超保真DNA聚合酶采用独特的核酸适配体修饰,非共价结合聚合酶从而在非循环反应中封闭聚合酶的活性,因此可以在常温条件下配制反应体系。X5超保真酶具有5’ 到3’ DNA 聚合酶活性和3’ 到5’ 的外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象,在标准缓冲液中其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase的50倍、Pfu DNA Polymerase的6倍。同时该酶还具有快速的DNA合成速度,约相当于普通Taq DNA Polymerase的4-6倍、Pfu DNA Polymerase的8-12倍。该酶合成能力很强,即使是复杂的模板,也能快速准确的完成反应,尤其适用于对保真性要求高的DNA长片段的快速扩增,如基因克隆、测序、定点突变、SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。使用聚合美X5超保真DNA聚合酶扩增得到的PCR产物无3'端突出碱基,不可直接用于TA克隆,可以直接连入聚合美特制的平末端TOPO克隆载体(货号MF021和MF022)。
【单位定义】
用大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74˚C、30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量。
【产品组份】
X5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase (1U/μl) 100 μl
10× X5 PCR Buffer 1.0 ml
25mM MgSO4 1.0 ml
2mM dNTPs 1.0 ml
【质量控制】
以λ DNA为模板,能有效扩增20 kb的DNA片段;以基因组DNA为模板,能有效扩增单拷贝基因;无内切酶和外切酶污染。
【适用范围】
热启动扩增,高保真扩增,长片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变等;高GC含量、具有二级结构的复杂模板的扩增。
【操作示例】
按下表配制PCR反应体系:
10× X5 PCR Buffer
2.5 μl
25mM MgSO4
2.5 µl
2mM dNTPs
2.5 µl
Primer 1 (10 μM)
0.5 µl
Primer 2 (10 μM)
0.5 µl
Template DNA*
10-200ng
X5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase
0.5µl
ddH2O补足至
25 µl
建议的PCR条件:
95°C
2 min.
32-36 cycles of:
94°C
15 sec.
53–64°C
15-20sec.
68°C
15-30sec./1kb
68°C
5 min.
4°C
forever
<*模板量:10~200 ng 基因组 DNA,10~30 ng 质粒,或 1~2 μl RT-PCR 反应后的 cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系>。
【备注】
本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。