- PCR,直接PCR,超保真PCR
- RT-PCR qPCR
- 核酸提取纯化
- 核酸电泳与DNAmarker
- 克隆、点突变
- 二代测序(NGS)
- 蛋白提取、电泳及WB
- 蛋白纯化、抗体
- 细胞生物学相关
- 耗材
- 产品定制分类
- 生化试剂
货号 | 规格 | 销售价 |
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MF862-01 | 1ml | 218.00 |
MF862-10 | 10x1ml | 1468.00 |
MF862-100 | 100x1ml | 12298.00 |
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产品名称 单位 货号
M5 超快速PAGE mix 1 ml MF862-01
M5 超快速PAGE mix 10×1 ml MF862-10
M5 超快速PAGE mix 100×1 ml MF862-100
【储存条件】
长期保存,请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,可置于4˚C保存至少六个月。
直接扩增最佳伴侣,收到后置于常温保存,如果4˚C或-20˚C保存出现结晶,请将该试剂置于 37℃水浴中重新溶解后摇匀使用。
【产品简介】
本产品包含聚合美特制的M5 Hiper超快速PAGE mix直接扩增最佳伴侣,可以迅速裂解酵母、农杆菌、革兰氏阳性菌、放线菌等微生物的细胞壁,短暂煮沸后的液体可以直接作为PCR模板;同样可以用于动植物组织细胞样品的裂解,是各种粗样品直接PCR的必备神器,可兼容普通Taq酶或高保真酶的下游PCR扩增。
本产品专供PCR后跑PAGE电泳而开发的mix,包含高纯度M5 Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。可最大限度地减少人为误差,可用于高特异性PCR反应及GC含量较高(>60%)具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR 产物的3’端附有一个突出的"A"碱基,纯化后可直接用于TA 载体克隆 (货号MF019或MF020)。本产品有含红色染料,在PCR 反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。红色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与300 bp 双链DNA 片段相近。
【产品组份】
储存温度 MF862-01 MF862-10 MF862-100
2x M5 Hiper超快速PAGE mix -20˚C 1 ml 10x1ml 100x1ml
M5 Hiper超快速PAGE mix直接扩增最佳伴侣 室温 1 ml 10x1ml 100x1ml
Nuclease-free ddH2O 室温 1 ml 10x1ml 100x1ml
【适用范围】
需要通过PAGE胶电泳检测的PCR反应。
基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。
3.用于从复杂模板中如基因组等扩增PCR产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。
【所需试剂】使用者仅需准备PCR反应的模板和引物等。
【样本处理方法】
裂解液处理样品时,加入的量以刚刚浸没样品为宜,不用加太多,以免造成样品过度稀释。
B、裂解液处理后的用做PCR模板,加入的量不要超过PCR体系的1/10。
1、 菌液样品
将培养至对数生长期的菌液(酵母、革兰氏阳性菌、农杆菌、放线菌培养液等)以菌液和裂解液体积比1:2混合(5ul菌液:10ul最佳伴侣),直接沸水浴3-5分钟,短暂离心后取1-2µl作为后续PCR模板。
2、 平板上的菌落
用灭菌枪头挑取少量菌体,加入10 µl最佳伴侣),吹吸混匀,沸水浴3-5 分钟,短暂离心后取1-2µl作为后续 PCR模板。
3、血液或其他液体样品(尿液、组织液或者各种体液)
参考方法1的比例进行混合和煮沸3-5分钟,短暂离心后取1-2µl作为后续PCR模板。
4、植物组织样品(叶片,果实、根组织等)
参考方法2 将固体样品尽量剪碎,取少量与裂解液混合煮沸3-5分钟,短暂离心后取1-2µl作为后续PCR模板。
5、动物组织样品(鼠尾、鼠耳等组织)
参考方法2 将固体样品尽量剪碎,取少量与裂解液混合煮沸3-5分钟,短暂离心后取1-2µl作为后续PCR模板。
6、 土壤等环境组织样品
参考方法2 将固体样品尽量捣碎,取少量与裂解液混合煮沸3-5分钟,短暂离心后取1-2µl作为后续PCR模板。
【PCR操作示例】
按下表配制PCR反应体系(冰上操作):
Template DNA(上述步骤准备)
1-2µl
2x M5 Hiper超快速PAGE mix
10 μl
Primer 1 (10 μM)
0.5 µl
Primer 2 (10 μM)
0.5 µl
Nuclease-free ddH2O补足至
20 µl
建议的PCR条件:
95°C
3 min.
32-36 cycles of:
94°C
25 sec.
55–64°C
25 sec.
72°C
30-60sec. /1 kb DNA
72°C
5 min.
4°C
forever
【备注】
本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。