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M5 超快速PAGE mix(无需提取基因组DNA)
货号 规格 销售价
MF862-01 1ml 218.00
MF862-10 10x1ml 1468.00
MF862-100 100x1ml 12298.00
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    产品名称             单位         货号

    M5 超快速PAGE mix        1 ml       MF862-01

    M5 超快速PAGE mix      10×1 ml     MF862-10

    M5 超快速PAGE mix     100×1 ml     MF862-100

     

     

    储存条件

     

    长期保存,请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,可置于4˚C保存至少六个月。

    直接扩增最佳伴侣,收到后置于常温保存,如果4˚C或-20˚C保存出现结晶,请将该试剂置于 37℃水浴中重新溶解后摇匀使用。

     

     

    产品简介

     

    本产品包含聚合美特制的M5 Hiper超快速PAGE mix直接扩增最佳伴侣,可以迅速裂解酵母、农杆菌、革兰氏阳性菌、放线菌等微生物的细胞壁,短暂煮沸后的液体可以直接作为PCR模板;同样可以用于动植物组织细胞样品的裂解,是各种粗样品直接PCR的必备神器,可兼容普通Taq酶或高保真酶的下游PCR扩增。

     

    本产品专供PCR后跑PAGE电泳而开发的mix,包含高纯度M5 Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。可最大限度地减少人为误差,可用于高特异性PCR反应及GC含量较高(>60%)具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR 产物的3’端附有一个突出的"A"碱基,纯化后可直接用于TA 载体克隆 (货号MF019或MF020)。本产品有含红色染料,在PCR 反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。红色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与300 bp 双链DNA 片段相近。

     

     

    产品组份

                                                储存温度    MF862-01    MF862-10    MF862-100

    2x M5 Hiper超快速PAGE mix                   -20˚C       1 ml         10x1ml      100x1ml

    M5 Hiper超快速PAGE mix直接扩增最佳伴侣     室温        1 ml         10x1ml      100x1ml

    Nuclease-free ddH2O                           室温        1 ml         10x1ml      100x1ml

     

     

    适用范围

     

    需要通过PAGE胶电泳检测的PCR反应。

    基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。

    3.用于从复杂模板中如基因组等扩增PCR产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。

     

     

     

    所需试剂】使用者仅需准备PCR反应的模板和引物等。

     

     

    样本处理方法

     

    裂解液处理样品时,加入的量以刚刚浸没样品为宜,不用加太多,以免造成样品过度稀释。

     

    B、裂解液处理后的用做PCR模板,加入的量不要超过PCR体系的1/10。

     

     

    1、 菌液样品

     

    将培养至对数生长期的菌液(酵母、革兰氏阳性菌、农杆菌、放线菌培养液等)以菌液和裂解液体积比1:2混合(5ul菌液:10ul最佳伴侣),直接沸水浴3-5分钟,短暂离心后取1-2µl作为后续PCR模板。

     

    2、 平板上的菌落

     

    用灭菌枪头挑取少量菌体,加入10 µl最佳伴侣),吹吸混匀,沸水浴3-5 分钟,短暂离心后取1-2µl作为后续 PCR模板。

     

     3、血液或其他液体样品(尿液、组织液或者各种体液)

     

       参考方法1的比例进行混合和煮沸3-5分钟,短暂离心后取1-2µl作为后续PCR模板。

     

     4、植物组织样品(叶片,果实、根组织等)

     

       参考方法2 将固体样品尽量剪碎,取少量与裂解液混合煮沸3-5分钟,短暂离心后取1-2µl作为后续PCR模板。

     

    5、动物组织样品(鼠尾、鼠耳等组织)

     

      参考方法2 将固体样品尽量剪碎,取少量与裂解液混合煮沸3-5分钟,短暂离心后取1-2µl作为后续PCR模板。

     

    6、 土壤等环境组织样品

     

    参考方法2 将固体样品尽量捣碎,取少量与裂解液混合煮沸3-5分钟,短暂离心后取1-2µl作为后续PCR模板。

     

     

    PCR操作示例

     

    按下表配制PCR反应体系(冰上操作):

    Template DNA(上述步骤准备)  

    1-2µl

    2x M5 Hiper超快速PAGE mix                      

    10 μl

     Primer 1 (10 μM)                      

    0.5 µl

     Primer 2 (10 μM)                     

    0.5 µl

     Nuclease-free ddH2O补足至

    20 µl

     

    建议的PCR条件

     

    95°C

    3 min. 

    32-36 cycles of:

     

    94°C

    25 sec. 

    55–64°C

    25 sec. 

    72°C

    30-60sec. /1 kb DNA

    72°C

    5 min. 

    4°C

    forever

     

    备注

    本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。