产品名称                                                          单位         货号

M5 Hiper Large Fragment Gel Extraction Kit    20T       MF741-T

M5 Hiper Large Fragment Gel Extraction Kit    50T       MF741-01

【储存条件】室温保存，有效期一年。

【产品组成】

【产品简介】

本试剂盒的优点为能更快更好地溶胶，回收效率更高。采用机械切割的硅胶膜作为离心吸附柱的吸附材料，高效特异结合回收目标DNA，去除污染杂质；应用优化的缓冲液融胶速度快，适用于TAE 和TBE 两种缓冲液。

本试剂盒回收5-10kb DNA 片段，回收效率高达 70％，10-20kb回收效率>50%，20kb以上仍有30%回收效率，远高于市场上同类产品的回收效率。回收的产物可用于PCR、酶切、 连接反应、测序等各种分子生物学实验。

【注意事项】

首次使用 WB（Washing Buffer 漂洗液）时，应依试剂瓶标注体积加入无水乙醇后混匀，并及时做好标记。

2、 Elution Buffer 使用前最好 55℃水浴预热

【自备试剂】 无水乙醇，异丙醇

【操作步骤】

柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入400 ul的平衡液BL，10,000 rpm 离心2 min，弃收集管中滤液，将吸附柱重新放回收集管中。（请使用当天处理过的柱子）

琼脂糖凝胶电泳后，小心切下所需的DNA 片段，尽量去除多余的凝胶，切成碎块装入5ml 离心管，称重。

注意：按照凝胶的重量近似地估计其体积，凝胶的体积可按如下方法计算：若凝胶块的重量为 0.2 g，则其体积为 0.2 ml。 

2、 加入 1倍体积的 QX3 溶胶液，颠倒混匀后放入 55℃水浴锅中加热 10 min。每隔2 min 颠倒混匀一次。

3、 溶胶结束后，冷却到室温，然后将溶液转移到吸附柱中，室温，12,000rpm 离心1min，弃收集管中废液。

注意：如果回收片段大于3kb，加入总体积1/2倍异丙醇可以提高回收效率。

4、 向吸附柱中加入 600μl WB漂洗液 （确认已加入乙醇），室温，12,000rpm离心 1min，弃收集管中废液。

5、 （可选步骤）如果要求纯度较高可重复步骤 4，一般实验不需要。

6、 将吸附柱重新放入套管中，室温，12,000rpm离心 2min。

7、 将吸附柱置于干净的 1.5 ml 离心管中，开盖静置 3-5 min，使痕量乙醇完全挥发。

8、 在吸附柱的中央加入 20~50μl Elution Buffer ，静置 1 分钟，室温，12,000rpm 离心1  min，所得液体即为纯化回收的 DNA 溶液。

【实验举例】

20kb大片段回收结果（北京生命科学园某工业客户）如下：

取5μL回收DNA和1μl原液进行琼脂凝胶，结果如下，经测算回收效率约为30%：

【备注】

本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。