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M5 HiPer Taq DNA Polymerase 经典Taq酶
货号 规格 销售价
MF041-01 500U 128.00
MF041-05 5x500U 518.00
MF041-10 10x500U 918.00
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    储存条件

    长期保存,请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,可置于4°C保存至少六个月。

     

    产品简介

    本产品是从高度耐热菌Thermus aquaticus 中克隆其DNA聚合酶基因,原核表达后经柱层析纯化获得的超纯、高效、耐热DNA聚合酶,SDS-PAGE 显示为一条94kD的蛋白条带。该酶除具有5-3DNA 聚合活性外,还具有少量的5-3DNA 外切活性,但不具有3-5DNA外切活性(校读活性),适用于常规PCR扩增。M5 Taq DNA Polymerase 扩增得到的 PCR 产物含有 3’-A 碱基,可直接用于 TA 克隆(聚合美TOPO-TA克隆载体货号:MF019MF020)

     

    产品组份

                                         MF041-01     MF041-05     MF041-10      MF041-F(定制)

    M5 Taq DNA Polymerase (5 U/µl)              100 μl         5x100 μl      10x100 μl          5x400ul

    10x M5 Taq PCR Buffer                       1ml           5x1ml         10x1ml          5x5ml

     

    活性定义

    用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物,在74℃、30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定义为 1 个活性单位(U)。

     

    适用范围

     1. 基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。

    2. 用于从复杂模板中如基因组等扩增PCR产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。

     

    所需试剂使用者需准备PCR反应的模板、引物、dNTPs和蒸馏水等。

     

    操作示例

    按下表配制PCR反应体系(冰上操作):

    Template DNA* 

    <1µg

    10× M5 Taq PCR Buffer                       

    2.5 μl

    10mM dNTPs

    0.5 µl

     Primer 1 (10 μM)                     

    0.5 µl

     Primer 2 (10 μM)                    

    0.5 µl

     M5 Taq DNA Polymerase(5U/µl)

    0.5 µl

     ddH2O补足至

    25 µl

     

    建议的PCR条件

     

    95°C

    3 min.

    32-36 cycles of:

     

    94°C

    25 sec.

    55–64°C

    25 sec.

    72°C

    30sec.-1min./1kb DNA

    72°C

    5 min.

    保持 4°C forever

     

     

     

     

    <*模板量:10~1000 ng 基因组 DNA1~30 ng 质粒,或 1~2 μl RT-PCR 反应后的 cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系>

     

    电泳结果检测:取2 μl反应液,添加上样缓冲液,电泳观察结果。