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M5 SuperFast Oligo Purification Kit 寡核苷酸纯化试剂盒
货号 规格 销售价
MF660-01 50T 578.00
  • 说明书:

    MF660-M5 Quick Oligo Purification Kit 寡核苷酸纯化试剂盒.pdf

    M5 Quick Oligo Purification Kit

    寡核苷酸纯化试剂盒使用说明书

     

     

    产品名称             单位          货号

    M5 Quick Oligo Purification Kit     50T     MF660-01

     

     

    储存条件

    按照指定温度储存,12个月内不影响使用效果。储存事项:避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

     

     

    产品简介

    本试剂盒使用特殊的结合缓冲液能够高效纯化>15nt的单链或者双链DNA和RNA。特别适用于从标记反应(地高辛标记,同位素标记,生物素标记等)混合物中回收小片段标记探针,去除未反应的核苷酸、短oligos、染料、酶、盐离子等。典型的回收率高达80-90%,每个离心吸附柱每次可吸附的 DNA 量为 10µg 。使用本试剂盒回收的RNA或者DNA可适用于in Situ Hybridization、Northern blot、RNAi、Gel shift assay、Ligation、Sequencing、Microarray analysis等实验。

     

     

    产品特色

    离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。

    使用了优质结合液,不含传统结合液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。

    独特的配方保证了该试剂盒比一般试剂盒回收效率大大提高。并且适用于回收单链或者双链DNA和RNA。

    快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。

     

     

    产品组份

    试剂盒组成

    保存

    50T

    平衡液

    室温

    5ml

    结合液OB

    室温

    12 ml   
    第一次使用前按说明加指定量异丙醇

    漂洗液RW

    室温

    10 ml   
    第一次使用前按说明加指定量乙醇

    RNase-free H2O

    室温

    10 ml

    RNase-free吸附柱RA

    室温

    50

    收集管(2ml

    室温

    50

     

     

    注意事项

    所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机。

    结合液中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。

    本试剂盒适用于无选择性的回收溶液中所有核酸片段,如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,请选择胶回收试剂盒。

    虽然本试剂盒推荐用于回收小片段或者寡聚核苷酸(>15nt),但是也可以高效回收<10kb的较大片段DNA或者RNA。

    回收RNA应该用本试剂盒带的RNase-free H2O来洗脱。并保存在-70℃。DNA片段也可以根据需要用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),如果担心EDTA影响下游反应,使用时适当稀释。或者直接用(10mM Tris-HCl pH 8.0)洗脱。

     

     

     

    平衡液使用

    介绍:核酸吸附硅胶膜柱子长期放置过程中会同空气中的电荷/尘埃发生反应而影响其核酸的结合能力。硅胶柱经平衡液预处理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团,提高核酸的结合能力。从而提高硅胶柱子回收效率或者产量。平衡液是强碱性溶液,若不小心碰到,请用大量自来水清洗。用完后需盖紧瓶盖,以免接触空气。室温保存。在保存过程中可能有沉淀生成,请加热至37℃使沉淀完全消失。

     

    使用方法:取一个新的硅胶膜吸附柱子装在收集管中,吸取100μl的平衡缓冲液至柱子中。13,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中废液,将吸附柱子重新放回收集管。此时平衡液预处理柱子完毕。接后续的操作步骤。

     

     

     

    操作步骤

    <第一次使用前请先在结合液OB瓶中加入指定量异丙醇! >

     

     

    <第一次使用前请先在漂洗液RW中加入指定量无水乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!>

     

     

     

    估计样品体积(最低体积50μl,不够可用灭菌水补足;回收RNA需要用RNase free H2O补足),向其中加入 10 倍体积的结合液OB,温和地充分混匀(PCR 反应体系无需去除石蜡油或矿物油)。

     

    回收>100bp片段时候,只需要加5倍体积结合液OB

     

    平衡液预处理吸附柱:

     

    使用平衡液预处理硅胶膜吸附柱为必做步骤,具体方法参见前文关于平衡液的使用

     

    将上一步所得溶液加入吸附柱RA中(吸附柱放入收集管中),室温放置1分钟,12,000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液。

         吸附柱最大容积为720µl,若溶液体积大于720µl,可分批加入。

     

    加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心30秒,弃掉废液。

     

    加入500μl漂洗液RW,12,000rpm离心30秒,弃掉废液。

     

    将吸附柱EC放回空收集管中,13,000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

     

    取出吸附柱RA,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free H2O,室温放置2分钟,12,000rpm 离心1分钟。如果需要较高浓度核酸,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,离心1分钟。

     

    洗脱体积越大,洗脱效率越高。如果需要核酸浓度较高,可以适当减少洗脱体积, 但是最小体积不应少于25μl,体积过小降低核酸洗脱效率,减少产量。

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

    备注

    本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。