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M5 Hiper Large Fragment Gel Extraction Kit (with column)(超大片段>4kb胶回收试剂盒)
货号 规格 销售价
MF741-01 50T 968.00
MF741-T 20T 568.00
  • 产品名称                                                          单位         货号

    M5 Hiper Large Fragment Gel Extraction Kit    20T       MF741-T

    M5 Hiper Large Fragment Gel Extraction Kit    50T       MF741-01

     

    储存条件】室温保存,有效期一年。

     

    产品组成

     

    20T

    50T

    Buffer BL平衡液

    10 ml

    25 ml

    QX3溶胶液

    10 ml

    30 ml

    WB漂洗液

    7.5 ml

    15 ml

    EB洗脱液

    10 ml

    10 ml

    吸附柱及套管

    20套

    50套

     

    产品简介

    本试剂盒的优点为能更快更好地溶胶,回收效率更高。采用机械切割的硅胶膜作为离心吸附柱的吸附材料,高效特异结合回收目标DNA,去除污染杂质;应用优化的缓冲液融胶速度快,适用于TAE 和TBE 两种缓冲液。

    本试剂盒回收5-10kb DNA 片段,回收效率高达 70%,10-20kb回收效率>50%,20kb以上仍有30%回收效率,远高于市场上同类产品的回收效率。回收的产物可用于PCR、酶切、 连接反应、测序等各种分子生物学实验。

     

    注意事项

     

    首次使用 WB(Washing Buffer 漂洗液)时,应依试剂瓶标注体积加入无水乙醇后混匀,并及时做好标记。

    2、 Elution Buffer 使用前最好 55℃水浴预热

     

     

    自备试剂】 无水乙醇,异丙醇

     

     

    操作步骤

     

    柱平衡:向吸附柱中(吸附柱放入收集管中)加入400 ul的平衡液BL10,000 rpm 离心2 min,弃收集管中滤液,将吸附柱重新放回收集管中。(请使用当天处理过的柱子)

     

     

    琼脂糖凝胶电泳后,小心切下所需的DNA 片段,尽量去除多余的凝胶,切成碎块装入5ml 离心管,称重。

     

    注意:按照凝胶的重量近似地估计其体积,凝胶的体积可按如下方法计算:若凝胶块的重量为 0.2 g,则其体积为 0.2 ml 

     

    2、 加入 1倍体积的 QX3 溶胶液,颠倒混匀后放入 55℃水浴锅中加热 10 min。每隔2 min 颠倒混匀一次。

     

    3、 溶胶结束后,冷却到室温,然后将溶液转移到吸附柱中,室温,12,000rpm 离心1min,弃收集管中废液。

     

    注意:如果回收片段大于3kb,加入总体积1/2倍异丙醇可以提高回收效率。

     

    4、 向吸附柱中加入 600μl WB漂洗液 (确认已加入乙醇),室温,12,000rpm离心 1min,弃收集管中废液。

     

    5、 (可选步骤)如果要求纯度较高可重复步骤 4,一般实验不需要。

     

    6、 将吸附柱重新放入套管中,室温,12,000rpm离心 2min。

     

    7、 将吸附柱置于干净的 1.5 ml 离心管中,开盖静置 3-5 min,使痕量乙醇完全挥发。

     

    8、 在吸附柱的中央加入 20~50μl Elution Buffer ,静置 1 分钟,室温,12,000rpm 离心1  min,所得液体即为纯化回收的 DNA 溶液。

     

     

     

     

    实验举例

     

     

    20kb大片段回收结果(北京生命科学园某工业客户)如下:

     

    动物基因组DNA提取物

    50μL洗脱液洗脱

    浓度(ng/μL)

    纯度(A260/280)

    5ul DNA

    9.034

    2.661

    8.250

    2.632

    10ul DNA

    11.376

    2.202

    11.974

    2.297

     

     

    取5μL回收DNA和1μl原液进行琼脂凝胶,结果如下,经测算回收效率约为30%:

     

     

     

    备注

    本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。